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蛋白質(zhì)生產(chǎn)高峰實(shí)驗(yàn)

閱讀:311發(fā)布時(shí)間:2016-6-27

蛋白質(zhì)生產(chǎn)高峰實(shí)驗(yàn)
1.  分別接種3×106 Sf9細(xì)胞于15個(gè)盛有5 ml 含10%胎牛血清的*培養(yǎng)液60 mm血組織培養(yǎng)皿中。27℃溫育2 h,使細(xì)胞貼壁,然后每次均以感染復(fù)數(shù)(MOI)為10的量,用野生型病毒感染7個(gè)培養(yǎng)皿,用重組病毒感染7個(gè)培養(yǎng)皿,剩余的一個(gè)培養(yǎng)皿為非感染對(duì)照。

 

2.  在感染后的不同時(shí)間(從感染后約15~72 h)收獲細(xì)胞,感染后15 h 收獲非感染細(xì)胞。將細(xì)胞和培養(yǎng)物上清轉(zhuǎn)移至離心管,4℃1 000 g 離心10 min,收獲細(xì)胞。

 

3.  處理并分析細(xì)胞和上清(分泌型重組蛋白)。


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