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上海酶聯(lián)生物研究所

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人慢性髓系白血病細胞 (K562)

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所在地上海市

更新時間:2017-07-26 22:00:55瀏覽次數(shù):195次

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本司*供應(yīng)細胞、ELISA試劑盒、生物試劑、血清、抗體、培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)品等多種科研試劑產(chǎn)品,產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)耐用,性價比好,值得信賴,需要“人慢性髓系白血病細胞 (K562)"歡迎您。

人慢性髓系白血病細胞 (K562)細胞介紹:
該細胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細胞曾被認(rèn)為來源于粒系,處于高度未分化階段;Anderson 等人作了細胞膜特性的研究后,認(rèn)為該細胞是紅白血病細胞系。該細胞是對自然 殺傷細胞高度敏感的體外靶標(biāo),故而被廣泛應(yīng)用于這方面的研究。K562的原始 細胞是一種具有多向分化潛能的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細胞,能自發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識的祖細胞。該細胞表達CD7(25 % )。
細胞特性:
1)來源:骨髓
2)形態(tài):淋巴母細胞樣;圓形,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。


人慢性髓系白血病細胞 (K562)細胞培養(yǎng)步驟:
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復(fù)蘇細胞:將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。


人慢性髓系白血病細胞 (K562)對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。


注意事項:
收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人慢性髓系白血病細胞 (K562)細胞用途:僅供科研使用。
 

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