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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒檢測樣品組織勻漿液的處理方法

時間:2017-9-25閱讀:407
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ELISA試劑盒檢測樣品組織勻漿液的處理方法:
一、將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
二、將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分
三、將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中
四、吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
五、尿液、唾液等其他液體生物樣本
ELISA試劑盒檢測樣品血清的處理方法:
1、血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
2、用無熱原的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出
3、4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清,建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
4、采血過程中應(yīng)避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測的不準(zhǔn)確性。
5、同時也應(yīng)避免細菌污染,因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測的假陽性。
 

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