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上海酶聯(lián)生物研究所

對(duì)ELISA試劑盒操作新手的技術(shù)培訓(xùn)

時(shí)間:2015-10-22閱讀:95
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一、實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備
    1.常見(jiàn)問(wèn)題
      ① 加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響*;
      ② 保溫設(shè)備不良;
      ③ 洗滌用水不規(guī)范。
    2.解決方案
      ① 校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國(guó)等);
      ② 仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
      ③ 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來(lái)水、礦泉水等。
      ④ 認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。
二、樣品加樣
    1.常見(jiàn)問(wèn)題
      ① 加樣不準(zhǔn)確;
      ② 沒(méi)有混勻。
    2.解決方案
      ① 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。
      ② 加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
三、洗滌不*這么辦?
    1. 每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
    2. 選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
    3. 可選用塑料洗滌瓶。
四、結(jié)果判斷
    1.常見(jiàn)問(wèn)題
      ① 包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
      ② 包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi),各孔均無(wú)顯色;
      ③ 陽(yáng)性對(duì)照不顯色,而其它樣本顯色正常;
      ④ 有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽(yáng)性困難。
    2.解決方案
      ① 可能是洗滌不充分;加樣過(guò)量;溫育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)溫度過(guò)高;按說(shuō)明書(shū)重新操作。如無(wú)改善,可與生產(chǎn)廠家;
      ② 可能是漏加樣本或酶液;溫育時(shí)間過(guò)短溫度過(guò)低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說(shuō)明書(shū)重新操作。如無(wú)改善,可與生產(chǎn)廠家;
      ③ 陽(yáng)性對(duì)照漏加、錯(cuò)加或失效。重新操作。如無(wú)改善,可與廠家,索要對(duì)照品;
      ④ 重新操作。使用酶標(biāo)儀,測(cè)定光吸收度,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
五、試劑不規(guī)范
    一定要在2-8℃存放。不得過(guò)高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。

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我公司技術(shù)員擁有多年的ELISA經(jīng)驗(yàn)及指導(dǎo)經(jīng)驗(yàn),每天為數(shù)位客戶解決技術(shù)問(wèn)題。近日,我司技術(shù)員總結(jié)了對(duì)ELISA試劑盒操作技術(shù)培訓(xùn),主要是一些實(shí)驗(yàn)新手的常見(jiàn)問(wèn)題,在這里分享給您供參考。

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