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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>如何完善ELISA試劑盒價格實(shí)驗中的過失
ELISA試劑盒價格實(shí)驗操作步驟多,新手操作難免會有過失。而這些過失很多是由細(xì)節(jié)不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實(shí)驗時少說話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會自己發(fā)掘問題,找出原因。那么我們要如何完善elisa試劑盒實(shí)驗中的過失?
①:評估試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
②:操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗確定成立后才能改進(jìn),比如洗板次數(shù)的掌握等。
③:加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。另外,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
④:檢驗技師應(yīng)具備從事實(shí)驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗。能熟練操作實(shí)驗儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實(shí)驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
⑤:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。
⑥:嚴(yán)格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。
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