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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒的標(biāo)本,貯運(yùn)和采集要素

時(shí)間:2018-7-26閱讀:206
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ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)要素:
1,ELISA試劑盒嚴(yán)峻溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽(yáng)性; 
2,混有紅細(xì)胞的血清 易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
3,如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反響; 
4,采血試管洗刷不*、ELISA試劑盒重復(fù)使用易穿插污染; 
5,塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。 
6,標(biāo)本凝結(jié)不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)端凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽(yáng)性成果;
ELISA試劑盒成果斷定常用的幾種辦法:
1,目測(cè)定性法:參加底物經(jīng)酶解和停止反響后,肉眼調(diào)查陽(yáng)性孔色彩顯著深于(競(jìng)賽法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的色彩挨近者,斷定為陰性。
2,以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性成果的閾值。
3,以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4,ELISA試劑盒定量測(cè)定成果依據(jù)規(guī)范曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

 

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