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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒的標(biāo)本,貯運和采集要素

時間:2018-7-26閱讀:204
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ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運要素:
1,ELISA試劑盒嚴(yán)峻溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性; 
2,混有紅細(xì)胞的血清 易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
3,如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響; 
4,采血試管洗刷不*、ELISA試劑盒重復(fù)使用易穿插污染; 
5,塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。 
6,標(biāo)本凝結(jié)不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中能夠構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;
ELISA試劑盒成果斷定常用的幾種辦法:
1,目測定性法:參加底物經(jīng)酶解和停止反響后,肉眼調(diào)查陽性孔色彩顯著深于(競賽法則淺于)陰性對照;與陰性對照的色彩挨近者,斷定為陰性。
2,以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性成果的閾值。
3,以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4,ELISA試劑盒定量測定成果依據(jù)規(guī)范曲線計算樣品中待測物的含量。

 

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