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上海酶聯(lián)生物研究所

elisa試驗過程解析

時間:2018-5-10閱讀:228
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elisa試劑盒測定試驗過程解析:
1、加樣:別離設(shè)空白孔、規(guī)范孔、待測樣品孔,空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔別離加規(guī)范品或待測樣品100μl,留意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時,為確保試驗結(jié)果有效性,每次試驗請使用新的規(guī)范品溶液。
2、棄去液體,甩干,每個孔中參加Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)制造),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4、每孔加工作液(臨用前15分鐘內(nèi)制造)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5、棄去孔內(nèi)液體,甩干洗板5次,辦法同過程C。
6、每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實踐顯況酌情縮短或延伸,但不行超過30分鐘,當(dāng)規(guī)范孔呈現(xiàn)顯著梯度時,即可停止)。
7、每孔加停止液50μl,停止反響,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,停止液的參加次序應(yīng)盡量與底物液的參加次序相同。
8、立即用酶標(biāo)儀在450nm波長丈量各孔的光密度(OD值),應(yīng)提前翻開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

 

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