在ELISA試驗(yàn)中，當(dāng)樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本的檢測(cè)。我公司ELISA試劑盒技能專家對(duì)此現(xiàn)象的原因剖析有兩個(gè)方面，一是試驗(yàn)差錯(cuò)、二是基質(zhì)效應(yīng) 。

、試驗(yàn)差錯(cuò)

差錯(cuò)分為三類，系統(tǒng)差錯(cuò)、隨機(jī)差錯(cuò)和過錯(cuò)差錯(cuò)。這三類差錯(cuò)中，系統(tǒng)差錯(cuò)對(duì)樣本值和空白值之間的差異無(wú)影響。ELISA樣本值低于空白值在差錯(cuò)方面首要來(lái)源于隨機(jī)差錯(cuò)和過錯(cuò)差錯(cuò)。

、基質(zhì)效應(yīng)

剖析中，基質(zhì)指的是樣本中被剖析物之外的組分，基質(zhì)常常對(duì)剖析物的剖析進(jìn)程有明顯的攪擾，并影響剖析成果的準(zhǔn)確性，這些影響和攪擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中，規(guī)范品不能選用人或動(dòng)物血清、血漿作為規(guī)范曲線的稀釋液，只能選用其模仿物。模仿物與被測(cè)樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性、pH等因素都會(huì)存在差異。當(dāng)樣本的基質(zhì)與其模仿物相比，下降抗原抗體的結(jié)合，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。形成樣本值無(wú)法計(jì)算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。

目前zui常用的去除基質(zhì)效應(yīng)的辦法是，經(jīng)過已知剖析物濃度的規(guī)范樣品，一起盡可能堅(jiān)持樣本中的基質(zhì)不變，樹立一個(gè)校正曲線。

當(dāng)單個(gè)樣本或少數(shù)樣本值低于空白值時(shí)，可能是差錯(cuò)原因，這時(shí)應(yīng)增加重復(fù)，提高操作技能。當(dāng)大量樣本都低于空白值時(shí)，應(yīng)考慮基質(zhì)效應(yīng)的影響，樹立校正曲線予以批改。

我們公司長(zhǎng)時(shí)間代理國(guó)內(nèi)外品牌產(chǎn)品，產(chǎn)品包含試劑盒、生化試劑、規(guī)范品、抗體、血清。以上內(nèi)容如有不太清楚的地方，或是了解其它技能問題，歡迎您聯(lián)絡(luò)我司業(yè)務(wù)員咨詢。