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當前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術文章>>科研試劑盒所需要樣本應該這樣做
ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫實驗中要害的一步,稍有不小心將致使實驗滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本,為協(xié)助我們了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及請求,我司做出了以下的剖析:
1. 血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清,保留過程中如呈現(xiàn)沉積,應再次離心。操作過程中避免任何細胞影響。運用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿:應根據(jù)標本的請求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘擺布 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去掉顆粒。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構(gòu)成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清,保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。檢查細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml擺布。經(jīng)過重復凍融,以使細胞損壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清 。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應再次離心。
5. 安排標本:切開標本后,稱取分量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保留備用。標本消融后依然堅持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),ELISA試劑盒用手藝或勻漿器將標本勻漿充沛。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢查,其余冷凍備用。
6. 標本收集后盡早進行獲取,獲取按有關文獻進行,獲取后應盡快進行實驗。若不能立刻進行實驗,可將標本放于-20℃保留,但應避免重復凍融.
7. 不能檢查含NaN3的樣品,因NaN3按捺辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA試劑盒技能的操作關鍵
優(yōu)異的試劑,杰出的儀器和的操作是確保ELISA檢測成果牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所區(qū)別,國內(nèi)醫(yī)學查驗通常均用板式點.本文將敘說板式注意關鍵,要具體的運用說明,嚴格遵循規(guī)則操作,必能得出的成果.
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