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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒有哪些應(yīng)用好處和效果

時間:2017-3-15閱讀:517
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ELISA試劑盒是免疫確診中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所導(dǎo)致的流行癥、寄生蟲病及非流行癥等方面的免疫確診。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,依據(jù)現(xiàn)已運用的成果,以為ELISA法具有活絡(luò)、特異、簡單、迅速、安穩(wěn)及易于自動化操作等特點。不只適用于臨床標(biāo)本的查看,并且因為一天之內(nèi)能夠查看幾百乃至上千份標(biāo)本,因而,也適合于血清流行病學(xué)查詢。本法不只能夠用來測定抗體,并且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種前期確診的杰出方法。
因而ELISA試劑盒可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研討抗酶抗體的合成。
3、閃現(xiàn)微量的免疫沉淀反響。
4、定量檢查體液中抗原或抗體成份。
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔參加待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,參加純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。

(3)洗板:吸干孔內(nèi)反響液,用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去),以后將洗刷液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖擺。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗刷3-4次。
(4)陰性對照孔每孔參加PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔參加1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-符號的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,
ELISA試劑盒悄悄混勻10s,置37℃暗處反響15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4停止反響。

(12)別離測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終究測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等形成的光攪擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,核算S/N值。S/N≥2.1為陽性斷定規(guī)范。
本公司多年專業(yè)酶免效勞,為專業(yè)的ELISA試劑盒供貨商之一,質(zhì)量保證,報價低,是國家重點實驗室及國內(nèi)各大院校長時間供貨商,本公司實驗室可免費提供代測效勞,等待您的來電!

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