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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒實驗過程中應(yīng)注意哪些常見的問題

時間:2017-3-3閱讀:291
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因為ELIS試劑盒日期不一樣,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官聯(lián)絡(luò),傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能切當(dāng)?shù)姆从丑w內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國外的科研工作者根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外查看特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(ELISPOT)。LISPOT法來源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA試劑盒技術(shù)的延伸和展開。
ELISA試劑盒實驗過程中遇到的各種疑問:
1,水質(zhì)要素:點復(fù)溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替
2,實驗操作要素
吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干
離心不*,延伸離心時間
樣本的污染,更換樣本
乳化未處理*,溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象
3,儀器試劑要素
離心管未清洗潔凈,準(zhǔn)確的洗刷用具
有機溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響成果
4,衍生化試劑要素(長時間衍生化試劑蛻變),更換衍生化試劑
5,與曲線好壞有關(guān),,保證曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本本身便是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染
水質(zhì)要素用,娃哈哈礦泉水代替
2.偏 高
添加量不準(zhǔn)確,的添加量
添加濃度不適合,添加適合的濃度
取液吹干量多,準(zhǔn)確的取液吹干 
取到其它相層液體,取需用相吹干
復(fù)溶液未稀釋或參與量少,準(zhǔn)確的稀釋復(fù)溶液

 

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