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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒的技術(shù)手段

時間:2017-2-27閱讀:301
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如今做方陣,做ELISA試劑盒已是駕輕就熟了,以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,如今給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日根本搞定。但是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的標(biāo)題,本人在剛開始做ELISA試劑盒時就面臨良多災(zāi)題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般富含更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。
ELISA試劑盒小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。還有有的包被原也許不是蛋白,對于*和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對其改造再加以包被,ELISA試劑盒親和素*:先親和素先包被載體,加入*化的DNA,這種包被辦法均勻、結(jié)實,已擴展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
ELISA試劑盒實驗中,查驗同一樣本達20次以上時,就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定成果的吸光值)散布在均值兩邊,大多數(shù)集中在均值附近。假如以測定值為橫坐標(biāo),以呈現(xiàn)的頻率為縱坐標(biāo)作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值,別的值以均值為中心對稱散布,這即是正態(tài)散布。

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