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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>入了ELISA的門,這些技術(shù)點你得知道
ELISA試劑盒檢測范圍及靈敏度相關(guān)問題
1、不同廠家的試劑盒的檢測范圍并不相同,一般說來,診斷試劑的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實驗前應(yīng)通過文獻和預(yù)實驗的方法確定樣本是否在所購試劑盒的范圍內(nèi),如果不在檢測范圍內(nèi),分兩種情況對待。
A.如果樣本中目標(biāo)蛋白太低,需找相應(yīng)靈敏度更高的試劑盒來檢測或濃縮樣本;
B.如果樣本中目標(biāo)蛋白太高,則需要進一步稀釋后進行檢測
2、靈敏度的問題
一般說來,如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個值因為與曲線是個“S"型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
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