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RGC-5;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保存

閱讀:58發(fā)布時間:2015-12-21

細(xì)胞名:RGC-5;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保存
細(xì)胞別名:RGC-5細(xì)胞;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞;RGC-5細(xì)胞
生物安全水平:1
培養(yǎng)基&血清:見培養(yǎng)條件
生物體:褐家鼠(大鼠)
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:
1、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂、漏液等情況,請及時做好照片記錄并。
2、擰松瓶蓋,細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或到第二天)
3、待細(xì)胞沉底后吸除上層液體RGC-5;視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保存(含碎片殘渣,請小心操作),然后吸取沉底的細(xì)胞層(2ml左右)轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶。
4、加入新鮮的*培養(yǎng)基(如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1、將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻。
2、吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿。
3、分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細(xì)胞密度保持5×10(5)/ml左右。
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度大于2×10(6)/ml以后重復(fù)1項操作或者凍存。
培養(yǎng)條件:GIBCO(1640+10%胎牛血清)+4.5%g/L葡萄糖(0.5%葡萄糖)
培養(yǎng)環(huán)境:95%空氣;5%二氧化碳(CO2)
溫度:37.0℃
保存:凍存血清:95%*培養(yǎng)基;5%二甲基亞砜(DMSO)
儲存溫度:液氮
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