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紅細(xì)胞裂解液說明書

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豬外周血淋巴細(xì)胞分離液
說明:適用于從血液中分離所需細(xì)胞。
紅細(xì)胞裂解液說明書密度:1.1100±0.0001g/ml
儲(chǔ)存條件:15-25℃避光保存,啟封后置4℃保存。


紅細(xì)胞裂解液
保存:2-8℃保存,保質(zhì)期2年。常溫運(yùn)輸。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品是利用細(xì)胞內(nèi)外存在鹽離子濃度差而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹裂的原理來分解無核紅細(xì)胞的。
本產(chǎn)品經(jīng)無菌處理,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。
紅細(xì)胞裂解液說明書使用說明: 
1.1倍體積的新鮮全血,加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋或顛倒混勻。
2.冰上放置15分鐘,其間輕輕渦旋混勻兩次,紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。
3.收集細(xì)胞:4℃,450×g離心10分鐘以沉淀白細(xì)胞,小心吸棄上清液。
4.向白細(xì)胞沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞。如起始血液為1ml,則加入2ml的紅細(xì)胞裂解液。
5.4℃,450×g離心10分鐘沉淀白細(xì)胞,小心并*吸去上清液。
6.重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如提取RNA,于此步開始使用DEPC水配制的溶液進(jìn)行操作。(組織細(xì)胞處理:新鮮組織經(jīng)*或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液,離心棄去上清液,其余同上。)
注意事項(xiàng):
樣品要求新鮮,建議血液等現(xiàn)采現(xiàn)做;在第二次裂解的時(shí)候,一定要將細(xì)胞充分懸起混勻,只要細(xì)胞分散充分,一般情況下都會(huì)裂解比較*。個(gè)別情況:如果樣品中含有有核紅細(xì)胞,則裂解不*。例如鳥或禽類的紅細(xì)胞。


*(阿氏液)
阿氏液
阿氏液。
配制方法
阿氏液配方如下:
葡萄糖 2.05克
檸檬酸鈉 0.8克
檸檬酸 0.055克
氯化鈉 0.42克
紅細(xì)胞裂解液說明書加蒸餾水至100毫升,加熱溶解后將pH值調(diào)到6.1,經(jīng)過69千帕,15分鐘的高壓滅菌,放置在4℃的環(huán)境內(nèi),保存?zhèn)溆谩?br>用途
阿氏液主要用于保存紅細(xì)胞,在4℃的環(huán)境下,紅細(xì)胞可以保存2周而不改變活性和特性。因此阿氏液用于采血、保存和運(yùn)送紅細(xì)胞進(jìn)行化驗(yàn)。


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