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大腸桿菌顯色培養(yǎng)基配方

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大腸桿菌顯色培養(yǎng)基
E.Coli Chromogenic Medium
用途:用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí),大腸桿菌顯藍(lán)綠色
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基是公司改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測(cè)。大腸桿菌顯藍(lán)綠色,大腸菌群顯無(wú)色,其它菌顯黃色或無(wú)色,革蘭氏陽(yáng)性菌被抑制。
成份 (g/L)
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)    37.9
顯色劑    0.2
瓊脂    12
pH 6.8 ± 0.2 25 ℃
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
注意 
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過(guò) 1 分鐘。分裝三角瓶, 121 ℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無(wú)菌平皿中心,傾入冷卻至 45 -50 ℃ 培養(yǎng)基約15ml ,混勻,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培養(yǎng) 18 ~ 24h ?;蚶鋮s至 45-50 ℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿,瓊脂*凝固后,在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí),加入適當(dāng)稀釋度的樣品液 1ml ,涂布于培養(yǎng)基上, 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18 ~ 24h 。 
貯存 
制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃,注意避光保存。 
失效 
干燥培養(yǎng)基超過(guò)保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟 
1 、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、 SN 標(biāo)準(zhǔn)、 FDA 標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液 
2 、取樣品液 1ml 加入 冷卻至 45-50 ℃顯色培養(yǎng)基中混勻或 涂布于平板上 
3 、 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ~ 24h ,選用有 30 ~ 200 個(gè)菌落的平板,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌落。 
總大腸桿菌 = 藍(lán)綠色菌落 
4 、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上, 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí),挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn) ( 本公司有生化鑒定管套裝 20 支 x3 種 ) 
質(zhì)量控制 
1 、外觀 
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無(wú)色固體培養(yǎng)基。 
2 、微生物試驗(yàn) 
在 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ~ 24h 小時(shí):
質(zhì)控菌株    ATCC    生長(zhǎng)情況    菌落顏色
單增李氏菌    27853    -/+    無(wú)色
*    25923    -/+    無(wú)色
大腸桿菌    25922    +++    藍(lán)色
沙門氏菌        +++    無(wú)色
大腸菌群        +++    無(wú)色
方法的局限性 
該顯色培養(yǎng)基鑒定大腸桿菌 ,少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性,但不會(huì)出現(xiàn)假陰性,有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征 
大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,大腸菌群為無(wú)色菌落,其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌落。


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