細(xì)胞丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(微板法)
機(jī)體通過(guò)酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過(guò)氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羥基、羰基、氫過(guò)氧基或內(nèi)過(guò)氧基，以及新的氧自由基等。脂質(zhì)過(guò)氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑，即非自由基性的脂類分解產(chǎn)物，而且通過(guò)鏈?zhǔn)交蜴準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)，放大活性氧的作用。因此，初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致很多脂類分解產(chǎn)物的形成，這些分解產(chǎn)物中，一些是無(wú)害的，另一些則能引起細(xì)胞代謝及功能障礙，甚至死亡。氧自由基不但通過(guò)生物膜中多不飽和脂肪酸的過(guò)氧化引起細(xì)胞損傷，而且還能通過(guò)脂氫過(guò)氧化物的分解產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。因而測(cè)試 MDA的量常常可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。MDA的測(cè)定常常與SOD的測(cè)定相互配合，SOD活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA的高低又間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，通過(guò)SOD與MDA的結(jié)果分析有助于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、藥理及工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。
細(xì)胞丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(微板法)產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、操作簡(jiǎn)便：可將試劑混合成單試劑操作，全程約50分鐘，可測(cè)48例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放12個(gè)月有效,試劑配制后至少能存放6個(gè)月；呈色穩(wěn)定，顯色后24小時(shí)吸光度不變。
3、再現(xiàn)性好：批內(nèi)CV=2.3%，批間CV=5.34%。
4、回收試驗(yàn)： X =101.8%。
5、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)等，效果均佳。
所需儀器及自備試劑：
1、細(xì)胞丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(微板法)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/*（比色測(cè)定波長(zhǎng)為532nm）
2、恒溫水浴箱（孵育溫度為95℃以上）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞：需用蒸餾水將紅細(xì)胞制備成溶血液（100倍溶血液）后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
操作流程：
1、按步驟加入樣本和試劑
2、漩渦混勻，95℃以上沸水浴40分鐘，流水冷卻，然后3500~4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，取上清待測(cè)
3、532nm波長(zhǎng)，1cm光徑，比色測(cè)定各管吸光度值
注：取樣量一般為0.1～0.2ml（樣本量夠直接取0.2ml測(cè)定）
批間CV 批內(nèi)CV 回收率 zui底檢出線 檢測(cè)范圍
4.11 3.5 104 0.5nmol/ml 0-113.0 nmol/ml
本試劑盒保存期：12個(gè)月。貯存溫度：2～8℃。
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