小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒使用目的：
為定量（性）測定活化的目標(biāo)濃度的血清，血漿，組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物液體,僅用于科研,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒組成
名稱 96孔配置 48孔配置 備注
微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 無
標(biāo)準(zhǔn)品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按說明書復(fù)溶
* 10mL 10mL 無
檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書稀釋
底物A 6mL 3mL 無
底物B 6mL 3mL 無
終止液 6mL 3mL 無
封板膜 2張 2張 無
說明書 1份 1份 無
自封袋 1個 1個 無
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃夜后于2000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8℃ 2000g離心30分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：2000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL*，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解，使其恢復(fù)為每個標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4-5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒其它相關(guān)試劑盒*：
| 小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(PAMPK)ELISA試劑盒 Mouse Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase，AMPK ELISA Kit |
| 小鼠褪黑激素Melatonin(MLT)ELISA試劑盒 Mouse MLT ELISA Kit |
| 小鼠β淀粉樣肽(1-42)ELISA試劑盒 Mouse 1-42 ELISA Kit |
| 小鼠β-肌動蛋白(β-Actin)ELISA試劑盒 Mouse β-Actin ELISA Kit |
| 小鼠補(bǔ)體3(C3)ELISA試劑盒 Mouse Complement 3，C3 ELISA Kit |
| 小鼠甲狀旁腺激素C(PTH-C)ELISA試劑盒 Mouse Parathyroid hormoneC，PTH-C ELISA Kit |
| 小鼠甲狀旁腺激素M(PTH-M)ELISA試劑盒 Mouse Parathyroid hormoneM,PTH-M ELISA Kit |
| 小鼠金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒 Mouse Metallothionein,MT ELISA Kit |
| 小鼠嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA試劑盒 Mouse CgA ELISA Kit |
| 小鼠糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒 Mouse Carbonhydrate Antigen 125,CA125 ELISA Kit |
| 小鼠糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒 Mouse Carbonhydrate Antigen 199,CA199 ELISA Kit |
| 小鼠糖類抗原242(CA242)ELISA試劑盒 Mouse Carbonhydrate Antigen 242,CA242 ELISA Kit |
| 小鼠糖類抗原724(CA724)ELISA試劑盒 Mouse Carbonhydrate Antigen 724,CA724 ELISA Kit |
| 小鼠細(xì)小病毒(MVM)ELISA試劑盒 Mouse MVM ELISA Kit |
| 小鼠胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 Mouse Glucagon,GC ELISA Kit |
| 小鼠白細(xì)胞介素9(IL-9)ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 9,IL-9 ELISA KIT |
| 小鼠*羥化酶(TH)ELISA試劑盒 Mouse TH ELISA KIT |
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