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卡邁舒化學技術(上海)有限公司


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牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒

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廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2018-05-09 22:05:47瀏覽次數(shù):177次

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產品簡介

卡邁舒化學技術(上海)有限公司專業(yè)致力于各種屬ELISA試劑盒的研發(fā),并無償提供代檢測服務,是國內多家科研機構及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應商,牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒是我司*產品之一,質量保證,*,發(fā)貨及時,運輸嚴格,產品得到諸多單位科研工作者的認可與支持,更有專業(yè)的技術團隊用心為您的科研之路保駕護航,做您身邊的科研伴

詳細介紹

牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒操作步驟:                

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。                

1、 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。                

 2、 棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。                

 3、 棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。               

4、 每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。                

 5、 棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。                

 6、 每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯se情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。                

 7、 每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。                

 8、 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。                

9、 實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。                

牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒 實驗操作注意事項:                

1、 保存:試劑盒中各試劑請按說明書提示合理存放。在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊或旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,否則可能會出現(xiàn)錯誤的結果。                

 2、 酶標板:剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結果造成任何影響。               

3、 加樣:加樣或加試劑時,*個孔與zui后一個孔的加樣時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預溫育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。每次的加樣時間控制在10分鐘內。*設置復孔實驗。

4、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時必須給酶標板覆膜;洗板后應盡快進行下步操作,避免酶標板處于干燥狀態(tài);嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。                

5、 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在吸水紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水。在讀數(shù)前要注意清除孔底殘留的液體和手指印,以免影響酶標儀讀數(shù)。                

6、 試劑配制:Detection Ab及HRP Conjugate體積較小,運輸過程會使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用前請手甩幾下或1000轉/分離心1min,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前,請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。標準品、Detection Ab工作液、HRP Conjugate工作液請依據(jù)所需的量配制使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請精確配制標準品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取Detection Ab時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、Detection Ab工作液、HRP Conjugate工作液。若需要分次使用標準品應按照每一次用量分裝,將其放在-20~-80℃貯存。避免反復凍融。                

7、 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如每隔5分鐘),如梯度已很明顯,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免顏色過深影響酶標儀讀數(shù)。               

8、 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。                

9、  混勻:充分輕微混勻對反應結果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微     量振蕩器,可在反應前手工輕輕敲擊酶標板框混勻。                

10、 安全:試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標      本時,請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。                

11、 不同批號的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應終止液除外)               

12、 試驗中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴禁混用,否則將影響試驗結果!               

牛檸檬酸合成酶(CS)ELISA試劑盒結果判斷:                

1. 每個標準品和標本的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪出標準曲線。                

2. *使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,然后將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                

3. 若標本OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數(shù)。

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