在動物ELISA試劑盒中的應(yīng)用有多種形式，可用于間接包被，亦可用于終反應(yīng)放大?？梢栽诠滔嗌舷阮A(yù)包被親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與*結(jié)合，通過親和素－*反應(yīng)而使*化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結(jié)合點充分暴露。另外，在常規(guī)ELISA中的酶標抗體也可用*化的抗體替代，然后連接親和素－酶結(jié)合物，以放大反應(yīng)信號。

    ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗. 動物ELISA試劑盒在這種方法中, 通常標準配體是固定的, 通過加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來使之成鍵. 通過加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來定量成鍵的受體, 而且zui初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測量. 第二種抗體能識別抗體的末端, 在其末端的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng), 可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個*分子親密結(jié)合?，F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉和(strepavidin)。

     *(biotin)又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物，*－羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide，HS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成*化的產(chǎn)物。親和素與*的結(jié)合，雖不屬免疫反應(yīng)，動物ELISA試劑盒但特異性強，親和力大，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個*分子的結(jié)合位置，可以連接更多的，形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和*與ELIS偶聯(lián)起來，就可大提高動物ELISA試劑盒的敏感度。