因此，在使用間接法測定IgM抗體時，通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或A預處理，以去除IgG的干擾。這樣不但測定較為繁瑣，而且影響測定的特異性和靈敏度。目前，常用的IgM抗體檢測方法為捕獲法，即以抗人IgM抗體(抗人u鏈)作為固相抗體，當加入血清標本時，ELISA檢測試劑盒其中的IgM類抗體(特異的和非特異的)即可被固相抗體捕獲，再加入特異抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結合后，加入酶標抗特異抗原的抗體，zui后加入底物顯色。具體操作步驟如下：
1．首先將抗人IgMbt鏈抗體于碳酸鹽緩沖液中40c下過夜包被聚苯乙烯等固相，形成固相抗體，洗滌去除未與固相結合或結合不緊的抗體后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封閉，洗滌去除未結合的部分及雜質。
2．加入含待測IgM抗體的臨床樣本如血清等，ELISA檢測試劑盒溫育一定時間后洗板；此時，待測樣本中的IgM抗體就會與固相上的抗P鏈抗體反應而吸附于固相上。
3．加入特異的抗原如HAV抗原、HBcAg等，溫育一定時間后洗板；此時，特異抗原就會與固相上的特異IgM抗體發(fā)生反應。
4．加入酶標記的抗特異抗原的抗體，溫育一定時間后洗板；此時，在固相上即形成相應的抗原抗體復合物。而特異IgM由于處于相應病原體的急性感染期，滴度很高，ELISA檢測試劑盒一定稀釋后，不會有明顯影響，況且，在某些病原體如HBV的慢性感染階段，IgM類特異抗體也能持續(xù)存在，只不過滴度要低很多。