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酶聯(lián)(上海)生物試劑科技有限公司資料大小
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315次 因此陽性反應呈色淺于陰性反應。如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有干擾質(zhì),直接包被不易成功,可采用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應的抗體,然后加入抗原,形成固相抗原。植物ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。當抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。
標本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少,洗滌除去抗原中的雜質(zhì),然后再加標本和酶標抗體進行競爭結(jié)合反應。競爭法測抗體有多種模式,可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結(jié)合,植物ELISA試劑盒一般采用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結(jié)合,洗滌后再加入酶標抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反應。
競爭法測抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標抗原愈少,zui后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等植物ELISA試劑盒測定多用此法。
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