實用ELISA試劑盒實驗對照方法
閱讀：86發(fā)布時間：2015-3-27
實用ELISA試劑盒實驗對照方法
由于是單細胞水平檢測，ELISPOT比ELISA更靈敏，能從20萬-30萬細胞中檢出1個分泌該蛋白的細胞。
捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內毒素的單抗，ELISA試劑盒在研究者以刺激劑激活細胞時，不會影響活化細胞分泌細胞因子。
目前ELISA法仍在研究當中占有著主流地位，ELISA試劑盒的普遍應用使得實驗更加方便、經濟和準確，ELISPOT技術的優(yōu)點也決定了它的發(fā)展?jié)摿Α?/span>LISPOT法來源于ELISA，相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破，是定量ELISA技術的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合，傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內的抗體及CK的水平。80年代，國外的科研工作者根據ELISA技術的基本原理，建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯(lián)免疫斑點技術(ELISPOT)。
隨著ELISPOT技術的不斷發(fā)展，它的優(yōu)勢也漸漸顯示出來，下面將ELISPOT與ELISA法對比區(qū)分。
ELISA試劑盒通過顯色反應，在酶標儀上測定吸光度，與標準曲線比較得出可溶性蛋白總量。
ELISPOT 也是通過顯色反應，在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現(xiàn)清晰可辨的斑點，可直接在顯微鏡下人工計數斑點或通過計算機輔助的分析系統(tǒng)對斑點進行計數， 1個斑點代表1個細胞，從而計算出分泌該蛋白的細胞的頻率。(某些研究不僅要測細胞因子生成量，還需檢測分泌此細胞因子的細胞頻率)
