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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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大鼠骨成型蛋白1(BMP-1)elisa試劑盒試驗(yàn)方法

時(shí)間:2017-9-15閱讀:965
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大鼠骨成型蛋白1(BMP-1)elisa試劑盒試驗(yàn)方法

1、要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20℃左右時(shí),1ml的水可以看作是1g,200ul的水可以看作是0.2g),每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。

2、在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3、吸取液體時(shí)速度不且太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭的液體和孔壁接觸,液體會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作使得部分液體不能流出而造成誤差。
5、吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
6、液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。

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7、孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線形。
8、實(shí)驗(yàn)前半個(gè)小時(shí)將試劑從冰箱中取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同。(酶標(biāo)板只要取出需要量)
9、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,應(yīng)靜置15-30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10、檢測(cè)吸光值前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
11、底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2mol的濃硫酸,具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
12、孵育時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書上的時(shí)間為準(zhǔn)。
13、不同廠家生物試劑的試劑盒因生物試劑工藝和操作方法略有不同,所以務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性。且同一廠家不同批次的產(chǎn)品也不能交叉使用。

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