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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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植物組織蔗糖(sucrose)含量檢測(cè)原理!

時(shí)間:2021/11/22閱讀:2272
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植物組織蔗糖(sucrose)含量檢測(cè)原理!

蔗糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物,也是糖分運(yùn)輸和儲(chǔ)藏的主要形式。因此,測(cè)定蔗糖含量對(duì)于植物糖代謝具有重要意義。此外,蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。

測(cè)定原理:

酸性條件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖進(jìn)一步與間苯二酚反應(yīng),生成有色物質(zhì),在480nm下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100ml×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體5ml×1瓶,4℃保存;

試劑三:液體 40ml×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體 10ml×1瓶,4℃保存;

試劑五:粉劑0.5g×1瓶,常溫保存

蔗糖提?。?/span>

稱取約0.1g樣本,常溫研碎,加入1mL提取液,適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到離心管中,置于80℃水浴鍋中10min,振蕩3~5次,冷卻后,離心取上清,加入2mg試劑五,80℃脫色30min,再加入1mL提取液,離心后取上清液測(cè)定。

測(cè)定操作表(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):

試劑(μL

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測(cè)定管

樣本



100

試劑一


100


蒸餾水

100



試劑二

50

50

50

   混勻,100'C煮沸5min左右(蓋緊,防止水分散失)

試劑三

700

700

700

試劑四

200

200

200

混勻,80℃水浴內(nèi)反應(yīng)10min左右,冷卻后測(cè)定480nm處光吸收值,空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管分別記為A1A2A3

蔗糖含量計(jì)算:

1、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

蔗糖含量(mg/mg prot )=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷蛋白濃度mg/mL。

2、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

蔗糖含量(mg/g鮮重)=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷樣品鮮重g/mL。

 

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

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