人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,HT-29進(jìn)口細(xì)胞基本特性
細(xì)胞數(shù)量:100萬個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,HT-29細(xì)胞.該細(xì)胞是1964年由Fogh
J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來,已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含血清的McCoy's 5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。
該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤,也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細(xì)胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素;表達(dá)*受體,但沒有檢測到血漿酶原活性;不表達(dá)CD4,但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺(HIV的可能替代受體)。該細(xì)胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性;p53基因過表達(dá),并且在273位密碼子處發(fā)現(xiàn)。
培養(yǎng)條件:DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES,
with NEAA Medium) 5%FBS
傳代方法:1:3~1:8傳代;每周2~3次換液。
傳代情況:P143
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測:培養(yǎng)法(-)
STR:
Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,12;D16S539:11,12;D18S51:13;D19S433:14;D21S11:29,30;D2S1338:19,23;D3S1358:15,16.3;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:10,16;FGA:20,22;TH01:6,9;TPOX:8,9;vWA:17,19;
染色體:64~69
使用權(quán)限:A類
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RD 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
客戶收到細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺(tái)的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注:實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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