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人*Ⅲelisa試劑盒標(biāo)本的保存方法:
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測.如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng).如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測.反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑.
實(shí)驗(yàn)過程中加樣可能碰到的問題:
1.過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
2.手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間;
3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。
相應(yīng)解決辦法:
1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2.加樣后及時(shí)放入孵箱。
3.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5.標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
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