產(chǎn)品名稱:小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1elisa試劑盒
規(guī) 格:96T
產(chǎn)品用途:僅供科研ELISA檢測試劑盒
“小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1elisa試劑盒"間接法步驟:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
4.(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.zui后一遍用DDW洗滌。
7.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
8.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
9.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
安全注意事項(xiàng):
1.避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4.elisa試劑盒請(qǐng)遠(yuǎn)離兒童。
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