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大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒

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所在地鹽城市

更新時間:2014-12-31 10:25:50瀏覽次數(shù):95次

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大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒操作簡便,無需特殊設備,并具有高度的敏感性和準確性,所以受到大家的廣泛重視,以致在較短時間內,于國內外均取得了較快的進展。

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大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒用途:

ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒操作步驟:

1.加樣:分別設空白孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。 

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。 

3.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見孔內有明顯藍色,即可終止)。 

5.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 

6.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內進行檢測

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