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人雄激素受體(AR)elisa試劑盒

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更新時(shí)間:2014-12-30 10:02:03瀏覽次數(shù):76次

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人雄激素受體(AR)elisa試劑盒靈敏度高,由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

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人雄激素受體(AR)elisa試劑盒在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個方面:

1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2.研究抗酶抗體的合成。

3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。

4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。

人雄激素受體(AR)elisa試劑盒操作步驟:

1.加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl*標(biāo)記抗體加99μl*標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。 

3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見孔內(nèi)有明顯藍(lán)色,即可終止)。 

5.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 

6.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測

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