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人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa試劑盒

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更新時間:2014-12-30 09:12:44瀏覽次數(shù):163次

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產(chǎn)品名稱:人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa試劑盒                  

英文名稱:Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin elisa Kit 

產(chǎn)品規(guī)格:48人份

人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa試劑盒用途:

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa試劑盒操作中應(yīng)注意以下5個方面:

 1.隨著其他因素影響,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標(biāo)本進行預(yù)處理,例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。

2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。

3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。

4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。

5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。

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