產(chǎn)品名稱:人抗紡錘體抗體(MSA)elisa試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48孔
保存條件:2-8℃
主要用途:科研檢測
人抗紡錘體抗體(MSA)elisa試劑盒操作步驟:
1.加樣:分別設(shè)空白孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl*標(biāo)記抗體加99μl*標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見孔內(nèi)有明顯藍色,即可終止)。
5.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
6.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測
“人抗紡錘體抗體(MSA)elisa試劑盒"實驗在做到嚴格要求的同時有著一些不能忽視的小細節(jié):
1.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
2.液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
3.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
4.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
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