我公司經(jīng)營(yíng)的ELISA試劑盒主要是進(jìn)口原裝的試劑盒,種類齊全,價(jià)格實(shí)惠,在我公司購買產(chǎn)品,方可免費(fèi)實(shí)驗(yàn)代測(cè)。試劑盒主要是48人份和96人份,關(guān)于試劑盒的其他信息可以來電索要說明書,或者在線咨詢銷售人員。
中文名稱:人白介素10elisa試劑盒
英文名稱:Human Interleukin 10,IL-10 elisa KIT
操作程序:
① 加抗體包被 → 4℃**,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值
人白介素10elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中酶標(biāo)比色儀的使用
酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀,通常指于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說,若某孔測(cè)得的A值為1.083,則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083±0.01(1.073~1.093),重復(fù)測(cè)定數(shù)次,其A值均應(yīng)1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測(cè)范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。
酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。
測(cè)讀A值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀,即每孔先后測(cè)讀兩次,*次在zui適波長(zhǎng)(W1),第二次在不敏感波長(zhǎng)(W2),兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測(cè)得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
樣品收集、處理及保存方法
血清
操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g 離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿
EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液
1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿
將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
保存
如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍