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江蘇晶美生物科技有限公司

人ELISA試劑盒樣本處理及要求

時間:2015-11-23閱讀:258
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在使用人ELISA試劑盒時,能夠正確的處理樣本,并能注意一些小細節(jié),在檢測過程中就能避免很多不必要的麻煩,讓你的整個檢測過程更快、更準(zhǔn)、更容易。

1.  血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

2.  血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

 3.  尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4.  細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用 PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5.  組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBSPH7.4 ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

ELISA試劑盒樣本要求,標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融;不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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