在免疫應(yīng)答過程中，CD4+T細(xì)胞的分化是很重要的一步。成熟的CD4+T細(xì)胞經(jīng)過表面TCR與抗原呈遞細(xì)胞表面的MHC-II-抗原復(fù)合體的相互作用，以及分泌的細(xì)胞因子的刺激，會促使T細(xì)胞激活進(jìn)而向不同的方向發(fā)生分化。
SRIT1是一類蛋白質(zhì)去乙酰化酶家族的成員，然而它在免疫反應(yīng)中的作用還沒有被報道過。首先，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)SIRT1在DC中具有非常高的特異性表達(dá)，然而DC特異性缺失SIRT1蛋白的突變體小鼠并沒有造成DC穩(wěn)態(tài)的缺陷。由此，科學(xué)家猜測SRIT1可能與DC調(diào)節(jié)后天免疫信號有關(guān)。之后，科學(xué)家將OT-II（CD4+T細(xì)胞特異性識別OVA抗原）的小鼠T細(xì)胞注入野生型與突變體小鼠體內(nèi)，并輔以OVA-CFA體內(nèi)刺激。一周以后，分別將它們的淋巴結(jié)取出進(jìn)行體外刺激檢測。結(jié)果顯示：兩組的T細(xì)胞在OVA體外刺激下均可以發(fā)生明顯的增殖，組間沒有明顯差異，然而在細(xì)胞因子的分泌方面，突變組小鼠能夠分泌更多的IFN-γ，說明Th1細(xì)胞的比例明顯增高；另外，突變組Treg細(xì)胞的比例發(fā)生了明顯下降。以上結(jié)果說明：SIRT1在DC中可能起到了調(diào)節(jié)CD4+T細(xì)胞分化方向的作用。
為了進(jìn)一步驗(yàn)證上述現(xiàn)象，科學(xué)家進(jìn)行了李斯特菌感染實(shí)驗(yàn)。正常情況下，李斯特菌感染能夠引起典型的1型免疫反應(yīng)。及產(chǎn)生大量的Th1型CD4+T細(xì)胞。結(jié)果顯示：當(dāng)DC缺失SRIT1時，小鼠體內(nèi)的Th1細(xì)胞數(shù)量明顯高于于對照組，同時Treg的比例也明顯下降。另外，在小鼠腸炎模型中作者也得到了相似的觀察結(jié)果。之后的體外實(shí)驗(yàn)也證明了SRIT1調(diào)節(jié)Th1以及Treg的相關(guān)特性。然而，SRIT1對于其他類型的細(xì)胞分化并沒有明顯影響。以上實(shí)驗(yàn)證實(shí)了SRIT1對于T細(xì)胞分化的調(diào)控作用。
進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，SRIT1缺失突變小鼠的DC在接受LPS刺激之后細(xì)胞因子的分泌也有差異：相對于野生型，缺失突變小鼠DC分泌更多的IL-12以及更少的TGF-β。另外，在體外刺激試驗(yàn)中額外加入anti-IL-12抗體（用于中和IL-12）或者TGF-β，發(fā)現(xiàn)兩者均能提高Treg的比例，同時降低Th1的水平，這一現(xiàn)象在野生組與突變組中同時能夠看到。這一結(jié)果說明IL-12與TGF-β在SRIT1下游調(diào)節(jié)T細(xì)胞的分化。
為了進(jìn)一步研究內(nèi)在的分子機(jī)制，科學(xué)家通過一系列的篩選實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SRIT1的缺失能夠增強(qiáng)DC中mTOR的信號以及促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子HIF1的積累。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)mTOR并不直接參與SRIT1的這一信號通路，然而HIF1的雙突變能夠恢復(fù)由于SRIT1缺失造成的表型。以上實(shí)驗(yàn)說明HIF1是直接參與SRIT1信號的中間分子。
會員1.png)