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技術(shù)文章

小牛血清使用注意事項以及正確的凍存方法

閱讀:553發(fā)布時間:2015-6-18

使用小牛血清時的注意事項具體如下:
  1.供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔,并在產(chǎn)后24小時內(nèi)抽血,此期間不得吸取母乳。
  2.以無菌操作自頸動脈放血,并在無菌條件下分離血清及濾菌,全過程在36小時內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一2 0 IC保存。
  3.血清使用前需做細(xì)蔭、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測定,在確實無污染的情況下方可使用。
  4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎(chǔ)培養(yǎng)墓和HAT培養(yǎng)墓中,對骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞進行培養(yǎng),觀察小牛血清對瘤細(xì)胞和融合細(xì)胞的細(xì)胞毒性。若在20%濃度小牛血清情況下,細(xì)胞生長差或死亡,則該批小牛血清不適宜應(yīng)用。
 怎么凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)物質(zhì)量受損:
  1.將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但有必要注重的是,溶解進程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。
  2.血清凍結(jié)后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉積物呈現(xiàn),該怎么處置
  3.血清中沉積物的呈現(xiàn)有許多緣由,但zui遍及的緣由是由于血清中脂蛋白的變性構(gòu)成的;而血纖維蛋白在血清凍結(jié)后,也會存在于血清中,亦是構(gòu)成血清沉積物的主要緣由之一。但這些絮狀沉積物,并不影響血清自身的質(zhì)量。若您欲去掉這些絮狀沉積物,能夠?qū)⒀宸盅b至無菌離心管中,以400g略微離心,上清液即可接著參加培育基內(nèi)一同過濾。不主張您以過濾的辦法去掉這些絮狀沉積物,由于它可能會堵塞您的過濾膜。




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