酶聯(lián)免疫法的全稱是酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法（即ELISA）它是應(yīng)用固相載體作為免疫吸附劑，以便于分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物。臨床上檢測(cè)抗原常用雙抗夾心型ELISA檢測(cè)抗體常用間接型ELISA。
雙抗夾心法和間接法的詳細(xì)介紹如下：
一、雙抗夾心法
雙抗夾心法的基本原理是將抗體包被載體后作為固相，加入待測(cè)標(biāo)本，使其中的相應(yīng)抗原通過(guò)免疫學(xué)反應(yīng)結(jié)合到固相抗體上，洗滌除去未結(jié)合的抗原；再加入酶結(jié)合物與已結(jié)合在固相抗體上的抗原反應(yīng)，并洗滌除去未結(jié)合的游離酶結(jié)合物。zui后加入酶的相應(yīng)底物，固相化的酶催化底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。在一定溫度下作用一定時(shí)間后終止反應(yīng)，顯色產(chǎn)物的量與結(jié)合在固相上的抗原量有關(guān)。用此法檢測(cè)的抗原，要求至少有二個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，故不能用來(lái)檢測(cè)半抗原物質(zhì)。整個(gè)個(gè)測(cè)定過(guò)程需要三次溫育和洗滌步驟，對(duì)每—待測(cè)抗原都要制備特異性的酶結(jié)合物。目的臨床上多用于檢測(cè)HBsAg、AFP和IgG等。
二、間接法
檢測(cè)體液中的抗體成分常用間接法。先用抗原包被固相，載體加入含待測(cè)抗體的體液標(biāo)本，溫育后洗滌；再加入酶，標(biāo)記的抗人IgG結(jié)合物，使之與結(jié)合在固相抗原上的人，IgG反應(yīng)，溫育后洗去游離的酶結(jié)合物。用酶相應(yīng)的底物反應(yīng)來(lái)測(cè)定酶活性，酶活性和待測(cè)標(biāo)本中與固相抗原結(jié)合的抗體量有關(guān)。
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