日前，有位ELIS試劑盒客戶在留言中問道：“做內(nèi)標法，說用的是內(nèi)標物，這個內(nèi)標物和對照品和規(guī)范品有什么不同呢？"針對該問題，我公司做出了一個全盤解析：
、什么是內(nèi)標物？
將一個已知質(zhì)量，樣品中不含有雜質(zhì)的純物質(zhì)，參加至待測樣品溶液中，以此純物質(zhì)的量為規(guī)范，比照測定待測組分的含量，該純物質(zhì)稱為內(nèi)標物。
內(nèi)標物需滿意下列要求：能*溶解于樣品中，且不與待測組分發(fā)作化學作用；峰位盡可能與待測組分的峰位接近，但能與待測組分*分開（別離度R≥1.5）的純物質(zhì)。若得不到純品，有必要預先測定其準確含量，且雜質(zhì)峰不得干擾待測組分峰。
第二、ELIS試劑盒試驗內(nèi)標法的長處
測定的成果較為準確，因為經(jīng)過丈量內(nèi)標物及被測組分的峰面積的相對值來進行核算的，因而在必定程度上消除了操作條件等的改變所引起的差錯。內(nèi)標法的缺陷是操作程序較為費事，每次剖析時內(nèi)標物和試樣都要準確稱量，有時尋覓適宜的內(nèi)標物也有困難。 外標法簡潔，但進樣量要求非常準確，要嚴厲控制在與規(guī)范物相同的操作條件下進行，不然形成剖析差錯，得不到準確的丈量成果。
第三、ELIS試劑盒試驗內(nèi)標物需滿意的條件
內(nèi)標法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標法的長處的一種辦法，它在參加內(nèi)標后，按峰面積歸一法的剖析辦法進行剖析，這就避免了因為進樣的一致性及樣品輕視效應導致的偶然差錯，因而，它的剖析精密度也是比較高的，是氣相色譜的一種比較抱負的定量剖析辦法。它的缺點是前處理比較復雜，所花費的時間也比較長，一起有必要要有適宜的標樣及內(nèi)標物才能進行內(nèi)標法定量剖析。關(guān)于內(nèi)標法定量剖析來說，內(nèi)標物的挑選是及其重要的。
它有必要滿意如下的條件：
① 內(nèi)標物與被剖析物質(zhì)的物理化學性質(zhì)要類似；
② 內(nèi)標物應能*溶解于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應；
③ 內(nèi)標物的出峰方位應該與被剖析物質(zhì)的出峰方位相近，且又不共溢出，目的是為了避免GC的不穩(wěn)定性所形成的靈敏度的差異；
④ 挑選適宜的內(nèi)標物參加量，使得內(nèi)標物和被剖析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，避免因為它們處在不同響應值區(qū)域而導致的靈敏度誤差。
第四、ELIS試劑盒試驗內(nèi)標法的操作
① 將已知量的內(nèi)標樣參加規(guī)范樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的作業(yè)標樣?；旌蠘藰又袠藰优c內(nèi)標樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標樣峰面積/內(nèi)標樣峰面積）為響應值。
③ 依據(jù)響應值與作業(yè)標樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成規(guī)范曲線。
④ 將已知量的內(nèi)標樣參加不知道樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應值。
⑤ 依據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。
第五、ELIS試劑盒試驗內(nèi)標法的特色
操作過程中樣品和內(nèi)標是混合在一起注入色譜柱的，因而只要混合溶液中被測組分與內(nèi)標的量的比值穩(wěn)定，上樣體積的改變不會影響影響定量成果。
內(nèi)標法抵消了上樣體積，甚至流動相、檢測器的影響，因而比外標法準確。
