1. 挑選的培育基開發(fā)戰(zhàn)略
在細胞培育進程中，培育基是操控產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)值和本錢的zui重要要素。有必要針對每種培育物來定制培育基，以優(yōu)化試驗效果。在決議以哪種方式來開發(fā)您的培育基時，您有幾個挑選。您可以購買現(xiàn)成的，自己開發(fā)，也可以與另一家公司合作開發(fā)特定的培育基。在這個進程中，您需求考慮時刻和本錢等要素。
2. 制造干粉培育基時評價水的質(zhì)量
液體培育基往往會帶來比干粉培育基更高質(zhì)量的效果。這可能與水的質(zhì)量有關(guān)。由于細菌在水中敏捷成長，故需求監(jiān)控內(nèi)毒素及其他污染物。商業(yè)公司有資源來監(jiān)控和操控細菌成長，比方過濾器。因而運用商業(yè)化出產(chǎn)的液體培育基會愈加可靠一點。
3. 利用細胞的代謝特性來優(yōu)化培育基
剖析運用過的培育基，有助于判定必要成分的代謝速率，包含氨基酸和維生素。從細胞成長階段和蛋白出產(chǎn)階段收集到的動態(tài)代謝圖譜可用來平衡基礎(chǔ)培育基和增加培育基，指導培育基的要點，有助于蛋白質(zhì)的出產(chǎn)。
4. 防止細胞的過度消化
*經(jīng)過消化擔任讓細胞與容器結(jié)合的蛋白質(zhì)，而實現(xiàn)貼壁細胞的傳代。如果細胞暴露在*中時刻太長，則*將開端切開細胞外表蛋白，這會影響細胞行進正常功用的才能。
5. 培育基中不要一向運用抗生素
跟著細胞培育物愈加頻頻地暴露在抗生素中，對抗生素有著天然耐藥性的菌株將開端呈現(xiàn)。這種現(xiàn)象可掩蓋潛在的污染，這對試驗對錯常有害的。
6. 保證一切試驗室資料都無菌
交叉污染是細胞培育的大敵。即使是zui輕微的污染，也可能毀了幾個星期的效果。因培育箱內(nèi)溫暖濕潤，真菌極易成長，因而有必要留意定時清潔。此外，在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前，運用酒精擦洗潔凈，以防止污染。
7. 當心處理您的培育物
細胞培育的脆弱性怎樣著重也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度動搖可能會對成長產(chǎn)生晦氣的影響。保證培育箱是水平的，溫度均一，且遠離電動儀器。此外，盡量防止一次處理多個細胞系，由于它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應(yīng)定時完結(jié)STR圖譜剖析，以承認細胞系的身份。
8. 在運用前正確凍結(jié)細胞
雖然凍結(jié)看起來是個簡略的進程，但有必要操作妥當，以免損傷細胞。長時刻暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因而，凍存管應(yīng)當在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培育基稀釋，以防止DMSO形成直接損傷。
9. 運用對數(shù)成長期的細胞
細胞培育進程共有3個階段：停滯期、對數(shù)期和渠道期，分別代表了低細胞成長、高細胞成長和無細胞成長。zui有生機的細胞是健康的，快速分裂的，在對數(shù)期以70-80%的集合度存在。
10. 在傳代之前不要讓細胞*集合
集合度是指貼壁細胞占有培育瓶外表積的比例。*集合意味著100%的外表都被貼壁細胞掩蓋。一定要防止這種狀態(tài)，由于它意味著細胞不能繼續(xù)成長。不過，燃眉之急是運用活潑成長的細胞。
