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ELISA試劑盒的抗原素

閱讀:211發(fā)布時(shí)間:2017-7-5

ELISA試劑盒抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分顯露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以選用直接的捕獲包被法,的特異抗體作預(yù)包被,這以后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。也可用親和素*系統(tǒng)作直接包被,即用親和素先包被載體,然后參與*化的DNA,這種包被方法均勻、健壯,ELISA試劑盒已拓展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性有些互相吸附,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;

(2)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶聯(lián)接構(gòu)成酶聯(lián)絡(luò)物,而此種酶聯(lián)絡(luò)物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性。
(3)酶聯(lián)絡(luò)物與相應(yīng)抗原或抗體聯(lián)絡(luò)后,可根據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來判定是不是有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度閃現(xiàn)試驗(yàn)效果。

 

ELISA試劑盒含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡(luò)的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的效果于。ELISA試劑盒可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以添加其吸附功用。例如,在查看抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而遍及的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之,包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進(jìn)程。

 

ELISA試劑盒是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所致使的流行癥、寄生蟲病及非流行癥等方面的免疫診斷


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