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技術(shù)文章

ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則十八條

閱讀:160發(fā)布時(shí)間:2016-11-24

1)ELISA試劑盒要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2)要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
3)要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4)實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
5)用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6)吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7)將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
8)液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
9)ELISA試劑盒溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
10)洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
11)洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
12)底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
13)檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14)底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
15)待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。
16)溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17)應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
18)ELISA試劑盒對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。


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