ELISA檢測試劑盒在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標本( S)和陰性對照(N)的A 值后，計算S/N 值。也有寫作P/N 的，這里的P 不代表陽性(positive)，而是病人(pati ent)的縮寫，不應誤解。為避免混淆，更宜用S/N 表示。在早期的間接法ELISA檢測試劑盒中，有些作者定出S/N 為陽性標準，現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的 S/N 的閾值。更應注意的是，N 所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來表示反應的強度，其實質(zhì)仍是一個定性試驗。
ELISA檢測試劑盒在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋后進行試驗，呈陽性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標本反應性的強弱，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。在間接法和夾心法 ELISA檢測試劑盒中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA 中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。
兩類反應的結(jié)果判斷方法不同，分述于下。在ELISA檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA檢測試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
ELISA檢測試劑盒有此測定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，在ELISA檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結(jié)合物后。
