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技術(shù)文章

如何避免ELISA試劑盒濃度負(fù)值

閱讀:288發(fā)布時(shí)間:2015-10-6

客戶(hù)經(jīng)常會(huì)問(wèn)用兩個(gè)不同廠(chǎng)家的ELISA試劑盒子測(cè)人血清中的TNF-α等指標(biāo)時(shí)都出現(xiàn)濃度負(fù)值, ,考慮是不是洗版太厲害了還是反應(yīng)溫度不夠,做第二遍的時(shí)候?qū)?shí)驗(yàn)方法,做了少許調(diào)整,將板置入36-37攝氏度的烘箱中反應(yīng),結(jié)果吸光度更低了,測(cè)的樣本的濃度仍然有很多負(fù)值,目前有兩個(gè)問(wèn)題:
1、目前的負(fù)值數(shù)據(jù)該怎么處理?
2、為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的問(wèn)題?

我司技術(shù)答復(fù):
血清中TNF-α值為負(fù)數(shù),可能有如下原因引起的:

*、因?yàn)楸4鎲?wèn)題,TNF-α在血清中極易降解造成測(cè)量值很小。

第二、因?yàn)檠逯幸恍┪镔|(zhì)對(duì)測(cè)量有干擾,造成OD值較低,甚至低于0濃度的OD值,表現(xiàn)為負(fù)值。

第三、實(shí)驗(yàn)溫度造成的,建議嚴(yán)格按照據(jù)說(shuō)明書(shū)要求操作。

樣本正確保存方法:ELISA實(shí)驗(yàn)血清、血漿樣本正確采集方法:檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。


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