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ELISA試劑盒板的制造流程

閱讀：374發(fā)布時(shí)間：2015-1-18

     關(guān)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)相信各位老師都不陌生，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)一般包含兩個(gè)或以上的孵育步驟，中間以洗滌隔開。ELISA試劑盒通常在96孔板中開展，其上包被了結(jié)合抗原或抗體。

     在封閉步驟后，包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結(jié)合（低親和力）的抗原-抗體復(fù)合物。接著，平板與二抗孵育。這種帶有酶的抗體與高親和力的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。之后，又是一輪洗滌。

     zui后是添加底物并檢測(cè)信號(hào)。是比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA試劑盒板的制造商通常會(huì)在試劑盒的使用手冊(cè)中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200 μl。如果你的試劑盒也是這樣，那么制造商可能會(huì)建議使用300 μl洗滌液進(jìn)行洗滌，以便清潔整個(gè)反應(yīng)孔的壁。

    一般來(lái)說(shuō)，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過，一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對(duì)于用戶包被ELISA試劑盒板，必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。


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