糖酵解系列_果糖1,6二磷酸FDP測試盒_微量法
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
果糖1,6-二磷酸是機(jī)體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),能影響細(xì)胞內(nèi)鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進(jìn)組織氧的釋放,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥制劑。
糖酵解系列_果糖1,6二磷酸FDP測試盒_微量法
測定原理:
醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產(chǎn)物與DNPH縮合成紫紅色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配制:
試劑一:液體110mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體0.4mL×1支,4℃避光保存。
試劑三:液體4mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體16mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理:
1.組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清待測。
3.液體:直接檢測。