組織總磷含量測(cè)試盒_分光光度法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
磷的存在形態(tài)包括無機(jī)磷與有機(jī)磷。無機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過測(cè)定總磷與無機(jī)磷含量即可了解作物對(duì)磷的利用率，進(jìn)而為合理施肥提供依據(jù)。
組織總磷含量測(cè)試盒_分光光度法
測(cè)定原理：
總磷經(jīng)消化后，轉(zhuǎn)化成無機(jī)磷。鉬藍(lán)法是測(cè)定無機(jī)磷含量的經(jīng)典方法，一定條件下，鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測(cè)定660nm光吸收，即可計(jì)算無機(jī)磷含 量，進(jìn)而可計(jì)算出組織中總磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、蒸餾水和濃硫酸。
試劑組成和配置：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存（強(qiáng)腐蝕性，強(qiáng)氧化性）。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入15 mL蒸餾水，溶解后再加入10 mL試劑二，混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支，－20℃保存。
有機(jī)磷消化：
取帶蓋試管，進(jìn)入精確稱取50℃烘干至恒重的約0.1 g組織，加濃硫酸1.0 mL，蓋緊（防止水分散失）后沸水浴10min左右，待溶液呈黑色或棕色時(shí)取出。稍冷后，加試劑一200μL，充分混勻，蓋緊后繼續(xù)沸水浴，直到溶液呈透明狀，取出室溫冷卻后，加蒸餾水8.8 mL，充分混勻；室溫，8000g，離心10min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
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