氧化與抗氧化系列_超氧陰離子(OFR)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號(hào)傳導(dǎo)的作用,但積累過(guò)多時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。
氧化與抗氧化系列_超氧陰離子(OFR)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成 NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和 α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在 530nm 處有特征吸收峰,根據(jù) ΔA 值可以計(jì)算樣品中 O2-含量,反應(yīng)式
為NH2OH + 2O2- +H+ → NO2- + H2O2 + H2O。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、氯仿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 110mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體 15mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑四:氯仿,自備。
超氧陰離子提?。?br/>
1. 植物、動(dòng)物組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后,10000g,4℃,離心 20min,取上清置于冰上待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);然后 10000g,4℃,離心 20min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血清或培養(yǎng)液:直接測(cè)定。