微量法--總抗氧化能力(DPPH法)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
研究意義:
測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
微量法--總抗氧化能力(DPPH法)測試盒
測定原理:
DPPH·為穩(wěn)定的自由基 ,溶于甲醇,乙醇等極性溶劑中,在 515nm 處有大吸收。向DPPH·溶液中加入抗氧化劑時,會發(fā)生脫色反應(yīng),因此可用吸光度的變化并以 Trolox 作為對照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。
自備實驗用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96 孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 120mL×1 瓶,使用前預(yù)冷。
試劑一:液體 45mL×1 瓶,避光保存。
樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 離心
10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超過
30d)后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
(3) 細胞樣品
按照細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎(功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。