氧化與抗氧化系列_二胺氧化酶測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動(dòng)物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損傷程度。
氧化與抗氧化系列_二胺氧化酶測(cè)試盒
測(cè)定原理：
DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過(guò)氧化氫，外源添加過(guò)量的辣根過(guò)氧化物酶，催化過(guò)氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成氧化型鄰聯(lián)茴香胺，在460nm處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定該波長(zhǎng)吸光度增加速率，計(jì)算DAO活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體120mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體0.3mL×1支，4℃保存。
試劑二：液體2.5mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體1.2mL×1管，4℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清等液體：直接測(cè)定。
注意事項(xiàng)：
1、如果OD值小于0.01，適當(dāng)加大提取用樣本量；OD值大于0.8，粗酶液可適當(dāng)稀釋，或者減少提取用樣本量。
2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。
環(huán)保在線