單胺氧化酶(MAO)測試盒_其它系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導(dǎo)致細胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。
單胺氧化酶(MAO)測試盒_其它系列
測定原理:
MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測定360nm光吸收下降的速率,計算MAO活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液一)進行冰浴勻漿,10000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1.0 mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1.0 mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定)取上清置于冰上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1.0 mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1.0 mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測定),取上清置于冰上待測。
3.血清:直接測定。